产品型号：

厂商性质：生产厂家

所在地：上海市

更新时间：2017-12-25

产品简介：

猪上皮衍生因子（PEDF）ELISA试剂盒代测

l 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中猪色素上皮衍生因子（PEDF）的含量。

l 有效期：6个月

l 保存条件：2-8℃

l 本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被猪色素上皮衍生因子（PEDF）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的猪色素上皮衍生因子（PEDF）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

猪上皮衍生因子（PEDF）ELISA试剂盒代测操作问题：

试剂准备不当可能影响酶联免疫吸附测定ELISA结果

在实验室，对试剂准备一般不太注意，通常的做法是，在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用，而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题，其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。

    因此，在ELISA测定中试剂的准备zui为关键的是，在实验开始前，将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20min以上后，再进行测定，以使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的，主要是为了在后面的温育反应步骤中，能使反应微孔内的温度较快地达到所要求的高度，以满足测定要求。其次，目前的商品ELISA试剂盒中的洗板液均需在实验室使用时对所提供的浓缩液稀释配制，因此稀释时所用的蒸馏水或去离子水应保证质量。

此外，当试剂盒以OPD为底物时，则底物溶液应在反应显色前临时配制。

样品要求

　·客户需提供待检测抗体和包被用抗原。

　·检测的样本为细胞培养上清、人和动物的血清、血浆。

　·样本收集后应立即-20℃保存，若长期保存应-70℃。

　·样本量的要求：若一个指标做复孔检测应不少于250ul，做单孔检测应不少于120ul。建议若客户样本量充足提供500ul以上。

  ·客户的样本收集后，立即按要求保存，切忌反复冻融。外地客户邮寄需要用干冰运输。邮寄前请与沟通确认。

Elisa定量测定/定性测定比较

Elisa定量测定

ELSIA操作步骤复杂，影响反应因素较多，特别是固相载体的包被难达到各个体之间的*，因此在定量测定中，每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。测定大分子量物质的夹心法ELISA，标准曲线的范围一般较宽，曲线zui高点的吸光度可接近2.0，绘制时常用半对数纸，以检测物的浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，将各浓度的值逐点连接，所得曲线一般呈S形，其头、尾部曲线趋于平坦，中央较呈直线的部分是的检测区域。

Elisa定性测定

定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或抗体作出"有"或"无"的简单回答，分别用"阳性"、"阴性"表示。"阳性"表示该标本在该测定系统中有反应。"阴性"则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果，即用滴度来表示反应的强度，其实质仍是一个定性试验。在这种半定量测定中，将标本作一系列稀释后进行试验，呈阳性反应的zui高稀释度即为滴度。根据滴度的高低，可以判断标本反应性的强弱，这比观察不稀释标本呈色的深浅判断为强阳性、弱阳性更具定量意义。

的回收率

    elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度，损失越少，回收率越高，如果作标液1PPM，就是1毫克/升，而作出标准数据为0.99毫克/升，就是说你的回收率是99%，这个与真实成分有密切的关系，说明方法的准确度。比如水中总无机氯含量测定,样品水中含有无机氯20mg/L,取100mL被测水样品,加入0.1mL浓度为10mg/mL的含无机氯标准样品,测定时忽略体积变化,如果测定出样品中无机氯为2.98mg/L,则认为回收率为98%。

对于定量检测来说，主要还是一个准确度的验证。不过我看到别人写的内容比我自己想说的要好，所以就贴上去了。相对回收率可能会高于100%的，如果只是说“损失程度”，其实是不准确的。应该说，回收率越接近100%，说明这个试剂盒的准确度越高。