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厂商性质：生产厂家

所在地：上海市

更新时间：2017-11-23

产品简介：

猴核因子κB抑制蛋白α（IKBα）ELISA试剂盒说明书

l 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中猴核因子κB抑制蛋白α（IKBα）的含量。

l 有效期：6个月

l 保存条件：2-8℃

l 本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断

 实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被猴核因子κB抑制蛋白α（IKBα）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的猴核因子κB抑制蛋白α（IKBα）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

猴核因子κB抑制蛋白α（IKBα）ELISA试剂盒说明书操作问题：

试剂准备不当可能影响酶联免疫吸附测定ELISA结果

在实验室，对试剂准备一般不太注意，通常的做法是，在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用，而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题，其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。

    因此，在ELISA测定中试剂的准备zui为关键的是，在实验开始前，将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20min以上后，再进行测定，以使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的，主要是为了在后面的温育反应步骤中，能使反应微孔内的温度较快地达到所要求的高度，以满足测定要求。其次，目前的商品ELISA试剂盒中的洗板液均需在实验室使用时对所提供的浓缩液稀释配制，因此稀释时所用的蒸馏水或去离子水应保证质量。

此外，当试剂盒以OPD为底物时，则底物溶液应在反应显色前临时配制。

样品要求

·客户需提供待检测抗体和包被用抗原。

·检测的样本为细胞培养上清、人和动物的血清、血浆。

·样本收集后应立即-20℃保存，若长期保存应-70℃。

·样本量的要求：若一个指标做复孔检测应不少于250ul，做单孔检测应不少于120ul。建议若客户样本量充足提供500ul以上。

  ·客户的样本收集后，立即按要求保存，切忌反复冻融。外地客户邮寄需要用干冰运输。邮寄前请与沟通确认。

回收率

    elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度，损失越少，回收率越高，如果作标液1PPM，就是1毫克/升，而作出标准数据为0.99毫克/升，就是说你的回收率是99%，这个与真实成分有密切的关系，说明方法的准确度。比如水中总无机氯含量测定,样品水中含有无机氯20mg/L,取100mL被测水样品,加入0.1mL浓度为10mg/mL的含无机氯标准样品,测定时忽略体积变化,如果测定出样品中无机氯为2.98mg/L,则认为回收率为98%。

对于定量检测来说，主要还是一个准确度的验证。不过我看到别人写的内容比我自己想说的要好，所以就贴上去了。相对回收率可能会高于100%的，如果只是说“损失程度”，其实是不准确的。应该说，回收率越接近100%，说明这个试剂盒的准确度越高。

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