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产品型号:sPECAM-1/sCD31
厂商性质:生产厂家
所在地:上海市
更新时间:2016-06-16
产品简介:
品牌 | R&D/美国 |
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一、Elisa试剂盒概述
ELISA试剂盒在国内有许多种叫法:例如:ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。 ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来,得到*科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。 Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
二、“小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒”样品收集、处理及保存
1)细胞培养上清:
适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2)细胞:
用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3)血清:
在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
5)体液:
包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6.)组织标本:
切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:
如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
三、操作步骤
1)取出试剂盒,室温(20-25℃)放置30分钟。
2)分组:取出96孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组(6个浓度)、空白孔、待测样品组。
3)标准品的稀释:准备小试管6 只,依次编好号码,先在各小试管中加入标准品稀释液100ul,然后取原浓度标准品100ul加入一只已编好号的试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第三只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第四只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第五只试管中,充分混匀;然后在该试管中取100ul,弃掉。第六只试管作为0 号标准品。
注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。
4)加样:依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入50ul的蒸馏水;其余微孔中先加样品40ul然后再加生物素标记的抗体10ul。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
5)温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
6)洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒弃去,如此重复5 次,拍干。
7)加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液(空白对照孔除外)。
8)温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。
9)洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置15-30s,充分清洗酶标板5次,用吸水纸*拍干。
10)显色:各孔加入显色剂A液50ul后,再加入显色剂B液50ul。
11)终止:25-37℃下避光反应10-15分钟,加入50ul终止液。
12)读板:在450nm波长读取各孔的OD值。
注:读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹,读板时间控制在终止反应后的30分钟内,以免影响准确性。
四、Elisa试剂盒特点
1、高效、灵敏、特异的抗体; 二、稳定的重复性和可靠性;
2、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
3、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
4、节省实验经费。
五、“小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒”优势
1.严格的质控体系:所有试剂盒从原料到成品经过严格的质控,确保试剂盒质量及稳定性。
2.产品经过不断优化,具有很好的灵敏度;
3.综合指标特性,研发便捷操作的试剂盒;
4.检测验证样本多样;
5.专业的研发团队为客户提供个性化的定制服务;
6.提供食品安全药物残留ELISA试剂盒,以及代测服务;
7.多年实践经验的技术老师,保证银河集团9873.cσmELISA试剂盒完善专业的售后服务;
8.高灵敏度、高精密度,高重现性,高特异性。不仅有高可靠性的实验结果,更为您节约实验成本和时间。
六、运输保障
■ 包装内置生物冰袋2-8℃低温运输、保存!
■ 试剂盒存放与EPS泡沫盒中,三层包装更加防止挤压碰伤!
■ ELISA试剂盒fapiao、说明书放于自封袋中更防水!
■ 25mm泡沫箱防水耐摔,快递暴力分拣也不怕!
七、“小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒”客户评论
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