产品型号：ACAC

厂商性质：生产厂家

所在地：上海市

更新时间：2016-06-06

产品简介：

一、产品简介：

【产品名称】：鸡乙酰乙酸检测(ACAC)ELISA试剂盒

产品规格：96T 48T

产品品牌：银河集团9873.cσm 

样品类型  血清、血浆、细胞培养上清等样品类型

检测方法  酶联免疫法

特 异 性  公司ELISA试剂盒具有较高的灵敏度和出色的特异性

交叉反应  由于当前的酶联免疫科学技术和知识有限，现有技术不可能完成药物检测的靶抗原之间和所有其他物种的类似物。因此，交叉反应可能仍然存在

样 本 量  50-100 μL

实验时间  1–4.5h

储存条件  2-8°C

储存方法  可以存储在2 - 8°C长达1个月（专家建议：4°C恒温保存，酶免试剂盒实验效果更佳）。对于长期存储,请在-20°C的存储。尽量保持试验板在密封铝箔袋，避免潮湿

有 效 期  6 months

使用优点  ELISA试剂盒可特异性定量测定疾病相关蛋白，包括细胞因子、趋化因子、β淀粉样蛋白与信号转导靶标。

■灵敏，准确和*的性能

■用血清、血浆、组织培养上清或裂解产物进行过验证

■在半天内可完成的现成，方便的检测

二、实验原理：
   用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素，经过*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。
三．实验材料与试剂配制：
1.仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 洗液的配制：按1:30的比例配制洗液备用。
四．“鸡乙酰乙酸检测(ACAC)ELISA试剂盒”样品收集、处理及保存：
1）.细胞培养上清：
适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。
2）细胞：
用PBS反复洗涤细胞3次，调整细胞浓度达到104-106/ml 左右，通过反复冻融，使细胞破坏并放出细胞内成份，或者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。
3）血清：
在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。
4）血浆：
应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上清。
5）体液：
包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。
6.）组织标本：
切取组织标本，称取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或匀浆器，或超声破碎仪将标本匀浆，以2000-3000 rmp离心20 分钟，收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：
如果样品不能立即检测，应将其分装，-70 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
五．操作步骤：
1）取出试剂盒，室温（20-25℃）放置30分钟。
2）分组：取出96孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6个浓度）、空白孔、待测样品组。
3）标准品的稀释：准备小试管6 只，依次编好号码，先在各小试管中加入标准品稀释液100ul，然后取原浓度标准品100ul加入一只已编好号的试管中，充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第三只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul 加入第四只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第五只试管中，充分混匀；然后在该试管中取100ul，弃掉。第六只试管作为0 号标准品。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
4）加样：依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入50ul的蒸馏水；其余微孔中先加样品40ul然后再加生物素标记的抗体10ul。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
5）温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
6）洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒弃去，如此重复5 次，拍干。
7）加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液（空白对照孔除外）。
8）温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。
9）洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置15-30s，充分清洗酶标板5次，用吸水纸*拍干。
10）显色：各孔加入显色剂A液50ul后，再加入显色剂B液50ul。
11）终止：25-37℃下避光反应10-15分钟，加入50ul终止液。
12）读板：在450nm波长读取各孔的OD值。
注：读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹，读板时间控制在终止反应后的30分钟内，以免影响准确性。

六.标准曲线的绘制方法：
可以采用各种绘图软件来绘制ELISA标准曲线，我公司以“Curve Exert1.3”软件为例，绘制的ELISA标准曲线如下：

七．数据计算：
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，即为样品的实际浓度。
八．“鸡乙酰乙酸检测(ACAC)ELISA试剂盒”必知项：
1. 水溶性、低黏度、无腐蚀、不易燃、*。
2. 所采用的方法特异性好，灵敏度、准确度、精密度。
3. 所用标准品或标准参考物符合推荐标准和要求。
4. 贮存期至少为1年。

九.配送服务：

    产品包装：在采样、发送、运输过程中有保冷温度要求的，公司均采用加厚款生物保温箱，内装生物冰袋，有效的控制产品温度，保证货物质量不受影响，同时并填充大量EPE发泡棉，具有*的缓冲弹性，它就像成千上万的小弹簧紧紧地保护在邮寄物品周围，它能有效的吸收严酷的冲击力，使邮寄物品免于破损，保证货物完好送达您手。

物流快递：鉴于各快递在全国各地承诺超配送范围与全国行政区划分有较大差异，以及快递会对其配送范围内进行不定期调整，我们目前无法实现准确定位，但我们会尽力协助您解决问题。 同时我们还为为上海市本地客户可提供送货上门服务，1个工作日送达。我司承诺，保障大家的货物*时间寄送，为大家提供快速、准确、安全、优质的配送服务。