产品型号：MCP-1/CCL2/MCAF

厂商性质：生产厂家

所在地：上海市

更新时间：2016-05-31

产品简介：

 一、服务

      我们可以根据您的应用需要，比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求，而量身定制检测试剂盒，有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。

二、兔子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒检测概述

      ELISA（酶联接免疫吸附反应分析）是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。 由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。

      实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即：用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。目前我们对客户提供比较常用的ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法服务。

三、兔子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒技术流程

双抗体夹心法(检测未知抗原) 间接法(检测未知抗体)

1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ guoye。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。

2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。

3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。

4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml

6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。 1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃guoye。次日洗涤3次。

2、加样：加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)

3、加酶标抗体：于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。

4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml

6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

四、ELISA试剂盒的性能：
准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
灵敏度：zui低检测浓度小于10 pg/ml。
特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

五、ELISA试剂盒的优点体现：
·特异性高：进行了广泛的非特异性排查，避免了由于交叉反应和干扰导致的实验数据误差。 
·精 度 高：通过加标回收率和线性稀释实验，确保样本值的准确性，精确度高于同类产品（较低的CV%）。 
·重复性好：lot-to-lot检测确保zui小的批间差异。 
·可靠性强：经优化的试剂盒组分可有效的zuzhi假阳性和假阴性试验结果。 
·标准曲线：在保证精准数据的前提下提供较宽的检测范围，以满足需求。 
·价格低廉：*RD试剂，国内分装配置，大大减少了客户因为价格高而必须购买国产试剂盒的顾虑。

六、ELISA试剂盒实验操作的常见问题：
1. 问--客户用48T试剂盒，大概只有十个样所以他一次用不完那么多板条，但是他想做两次，可封板膜只有一张，那如果用完了怎么办？可以用什么别的东西取代吗？
答--可以把封板膜剪掉，用多少剪多少也可以用封口膜替代。
2. 问--实验过程中温育是放在哪温育呢？
答--可以在水浴箱、细胞培养箱和烘干箱里面都行，只要恒定温度为37度。

七、ELISA试剂盒的必知项：
1. 水溶性、低黏度、无腐蚀、不易燃、*。
2. 所采用的方法特异性好，灵敏度、准确度、精密度。
3. 所用标准品或标准参考物符合推荐标准和要求。
4. 贮存期至少为1年。

八、兔子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒洗板方法
1.  手工洗板方法：吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需要，重复此过程数次。
2.  自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
特异性
    本试剂盒可同时检测重组或天然的人C3，且与其它相关蛋白无交叉反应。