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基础信息Product information
产品名称:

ELISA试剂盒代测,人巨噬细胞炎性蛋白3β ELISA试剂盒代测

产品型号:MIP-3β/ELC/CCL19

厂商性质:生产厂家

所在地:上海市

更新时间:2015-12-23

产品简介:

人巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化,如果颜色较深,请提前加入终止液终止反应。

产品特性Product characteristics
品牌R&D/美国

【名称】:人巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒

【规格】:48T/96T
【方法】:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
【性状】: 液态
【Elisa试剂盒种属】马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
【标本】血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等
【用途】:科研 实验
【贮存】: 贮存于2℃-8℃.如有需要,我们将竭城为顾客提供售前,售中,售后的*服务!
人巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存
1).细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2)细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3)血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4)血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
5)体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6.)组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒操作步骤
1)取出试剂盒,室温(20-25℃)放置30分钟。
2)分组:取出96孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组(6个浓度)、空白孔、待测样品组。
3)标准品的稀释:准备小试管6 只,依次编好号码,先在各小试管中加入标准品稀释液100ul,然后取原浓度标准品100ul加入一只已编好号的试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第三只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第四只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第五只试管中,充分混匀;然后在该试管中取100ul,弃掉。第六只试管作为0 号标准品。
注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。
4)加样:依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入50ul的蒸馏水;其余微孔中先加样品40ul然后再加生物素标记的抗体10ul。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
5)温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
6)洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒弃去,如此重复5 次,拍干。
7)加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液(空白对照孔除外)。
8)温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。
9)洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置15-30s,充分清洗酶标板5次,用吸水纸*拍干。
10)显色:各孔加入显色剂A液50ul后,再加入显色剂B液50ul。
11)终止:25-37℃下避光反应10-15分钟,加入50ul终止液。
12)读板:在450nm波长读取各孔的OD值。
注:读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹,读板时间控制在终止反应后的30分钟内,以免影响准确性。
数据计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,即为样品的实际浓度。
人巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒注意事项
1)实验操作中必须使用一次性吸头,避免交叉污染。
2)加样:加样时,要控制加样速度,避免*孔与zui后一孔间的时间间隔过大,否则将会导致不同的预孵育时间,从而影响实验的准确性以及重复性。
3)孵育:严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
4)反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化,如果颜色较深,请提前加入终止液终止反应。
5)建议实验前预测样品含量,如样品浓度过高,应对样品进行稀释,计算结果时乘以相应的稀释数。
6)建议使用本试剂盒时先做预实验(即先做标准曲线,试用几个标本),如果对本试剂盒有任何疑问,可和所购经销商,如果因运输过程导致试剂盒失效,可要求调换,但概不承担产品本身以外的任何损失。
人巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒退换货政策
若发生退换货需求,请先致电客服人员。符合退换货政策的,我司将与您签订退换货协议,并根据协议进行退换货。
特别说明,以下情况不予办理退换货:
1、客户在订购产品时请仔细确认后再行订购,由客户选型失误而造成的退货需求,我方不承担任何责任。产品大多性质较为特殊,存储方式复杂,请用户按照贮存条件说明妥善保存。
2、已超过受理期限的产品;
3、产品无标签,或标签已无法识别是否属于我司试剂的产品;
4、密封产品原包装打开,一次性封贴或胶条破损(质量问题除外);
5、产品已使用(质量问题除外);
6、由于您的操作原因、使用环境限成的误报以及实际情况与您描述不符,我司将不予受理申请退货;
7、涉及产品退回,客户需要与我们客服人员并按照相关指导操作运输事宜。

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