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日期:2016/1/27浏览:990次
培养基是我公司的主要产品线之一,在前面的技术分享内容中,相关培养基的制备方法、要求、保存、种类等也为大家介绍过不少。在今天的内容中,银河集团9873.cσm公司为您带来了的培养基制备流程,可以表示为:称量药品→溶解→调节PH值→溶化琼脂→过滤分装→包扎标记→灭菌→摆斜面或倒平板。
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1.称量药品:根据培养基配方依次准确称取各种药品,放入适当大小的烧杯中,琼脂不要加入。蛋白胨极易吸潮,故称量时要迅速。
2.溶解:用量筒取一定量(约占总量的1/2)蒸馏水倒入盛有药品的烧杯中,在放有石棉网的电炉上小火加热,并用玻璃棒搅拌,以防液体溢出。待各种药品*溶解后,停止加热,补足水分。如果配方中有淀粉,则先将淀粉用少量冷水调成糊状,并在火上加热搅拌,然后加足水分及其他原料,待*溶化后,补足水分。
3.调节PH值:根据培养基对PH值的要求,用50g/LNaOH或5%(体积分数)HCl溶液调至所需的PH值。测定PH值可用PH试纸或酸度计等。
4.溶化琼脂:固体或半固体培养基须加入一定量的琼脂,将盛有培养基的器皿置于电炉上一面搅拌一面加热,直至琼脂*溶化后才能停止搅拌,并补足水分(水需预热)。注意控制火力不要使培养基溢出或烧焦。
5.过滤分装:先将过滤分装装置安装好。如果是液体培养基,玻璃漏斗中放一层滤纸;如果是固体或半固体培养基,则须在漏斗中放多层纱布,或两层纱布夹一层薄薄的脱脂棉趁热进行过滤。过滤后立即进行分装。分装时注意不要使培养基沾染在瓶口或管口,以免浸湿棉塞,引起污染。液体分装高度以试管高度的1/4左右为宜。固体分装量为管高的1/5,半固体分装量一般以试管高度的1/3为宜,分装三角瓶,以不超过三角瓶容积的一半为宜。
6.包扎标记:培养基分装后加好棉塞或试管帽,再包上一层防潮纸,用棉绳系好。在包装纸上标明培养基名称、制备组别和实验者姓名、日期等。
7.灭菌:上述培养基应按培养基配方中规定的条件及时进行灭菌。普通培养基为121℃,20min,以保证灭菌效果和不损伤培养基的有效成分。如需要作斜面固体培养基,则灭菌后立即摆放成斜面。斜面长度一般以不超过试管长度的1/2为宜;半固体培养基灭菌后,垂直冷凝成半固体深层琼脂。
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