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沪鼎分析如何应对ELISA抗体的正确识别能力

日期:2014/12/25浏览:484次

怎样知道抗体对蛋白质的正确识别能力?
 
上海沪鼎分析:
    首先用间接的ELISA分析做确认,ELISA板上用动物免疫反应的蛋白质或多肽包被,把血清加入板中孵育,随后二抗发出信号。这是*个证据能说明免疫动物产生的抗体能识别目标蛋白或肽。
    然而,这个结果可能与在自然组织中检测到的水平不直接对应。
    ELISA试剂盒板上包被了很好的暴露的多肽或蛋白质,在只含有少数细胞的自然组织蛋白中可能不会发生。因此,测试包括收集已知或我们猜测能正确表达目标蛋白的材料。另外也包括以缺失或过表达突变体提取物为对照的测试。在免疫印迹中使用重组蛋白作为对照,可能会为我们提供一些信息,但在某些情况下, 产生的抗体只识别重组蛋白而不识别天然的蛋白质。另一个风险是,我们的膜暴露的时间太短,使得只能显示出重组蛋白的信号。考虑特定组织的表达水平,遵循一定的发展模式,有些蛋白质难以检测。为了测试的成功所有这些因素都必须考虑在内。

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