今日上午，我司钱收到来自上海交通大学一位学生的，咨询到ELISA试剂盒实验流程中要重点注意哪些地方？我司将此问的解析整理如下：

各种类型测定时一般需经过以下步骤：
    固相包被→加待测样品→温育→洗涤+加酶标物→温育→洗涤→加底物→温育一加终止液→比色→判定结果。ELISA操作较繁杂，操作不当将引起较大的误差。
实验流程中需要重点注意的地方：
    1、随着病情的进展或由其他因素影响，某些抗体在机体内的含量发生大幅波动，因此有必要对标本进行预处理。
    2、在成批手工检测中，还应注意操作时差的影响。加样及混匀时间的差异，使抗原抗体反应和酶促反应时间不一致，对竞争法及定量检测影响很大，不注意可能会导致错误结果或定量不准。
    3、洗涤可用洗板机洗板或手工洗板，前者洗涤质量较好，各反应孔洗涤效果均一，批内、批间差异小，手工洗板应注意控制各孔洗涤效果，差异不宜太大。
    4、准确判定结果须使用测读仪（酶标仪），比色法判读可选择单波长或双波长，根据反应液颜色的不同选用不同波长的滤光片，以空白孔校零测定反应孔的吸光度值（A值）。酶标仪具有良好的重复性。
             

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