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日期:2015-11-03浏览:1104次
在elisa实验中新手朋友由于各种的原因重复性会差,上海沪鼎的钱为您详细整理了重复性差的9大因素:
1、样品数量不一,加样时间长短不一 | 重复某一样品时,加样时间尽可能与*次接近 |
2、样品加入后未混匀 | 加样后在混匀器上充分混匀 |
3、酶标仪滤光片不对或输入波长不对 | TMB显色用450/630波长 |
4、酶标仪测定重复性差 | 校对酶标仪 |
5、洗涤不正确 | 洗涤液注满各孔但不要溢出。洗板时反应板面向下,垂直用力甩净内容物(可多甩几次),在干净、无或少尘的吸水材料上拍干。洗板机洗板时不应有堵孔,洗涤应充分 |
6、温育条件不一致(一次用水育,一次用恒温箱) | 恒温箱温育较水浴显色深, OD值高出0.1-0.15,均采用恒温箱.如用水浴水温应控制在37℃ |
7、不慎多加或少加酶或显色剂 | 多加时显色深,少加则浅,用记号笔圈上,便于分析 |
8、阈值附近时阴时阳 | 同一样品做三个复孔,以二个(含二个以上相同结果为准) |
9、加样量不足、保温时间、洗涤条件一致 | 尽可能使用同一移液器和装紧吸嘴重复测定标本。条件、人员等应尽量与上次保持一致 |
希望经过以上的分析能使您避开这些问题,能成功的做出的实验!