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日期:2015-08-05浏览:1104次
其实ELISA的原理及方法是比较简单的,相关ELISA操作的资料,网上很多,但是真正到自己亲手操作的时候还是会犯糊涂。今天我们就来仔细说说这方面的问题,上海沪鼎解析:实验新手如何【运用ELISA试剂盒】?
1.对于一些小分子的检测,一般来说,要用竞争法ELISA去检测,也要购买采用这个方法的盒子。一般细胞因子的检测,都是采用常规的夹心法ELISA检测,因为因子分子量比较大,一般10几个KD左右,很容易找到两个或者多个抗原表位。
而小分子很难找到两个不同的表位,也就决定了包被抗体和检测抗体无法同时结合小分子并固相化。解决方案就是酶标板上包被二抗,每个孔加入一定量的酶标的小分子,然后加样品,再加不带标记的检测抗体,显色底物。样品的目的小分子的含量越高,吸光度越低。
2.还有一个问题,这是不是客户的误区,就是拿来一个指标就想当然地尝试用ELISA去检测。ELISA检测方法简单,灵敏度高,但是该检测活性的检测活性,该做western的做western。
·特别说明
① ELISA试剂盒规格有96T和48T两种,打开包装后要及时检查所有物品是否齐全完整。
② 一周内使用可存于4℃,需长时间存放或多次使用建议存于-20℃。
·上海沪鼎对ELISA的操作提醒:
① 将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
② 液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
③ 温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
④ 洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温6作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
⑤ 洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
另外,要想熟练的【运用ELISA试剂盒】,还需要多动手多操作。今天是八月的*个工作日,您有需要了解的相关信息或者资料内容,都可以在本公司中留言。上海沪鼎随时欢迎!