一周之中的工作日不过只有五天，时间的紧张是否让您不知该浏览哪一个实验了呢？不管是何事物，足够才是zui重要的。今天已经周四了，沪鼎推荐本周zui值得关注的实验，述制备核提取物的完整过程。上海沪鼎以质量求生存，以信誉求发展的精神，精益求精，力求做到更好！
    本次实验一共需要十二个步骤，看似麻烦，我们为您逐条整理好，让您了解中更明白。
1、①收集转瓶培养的细胞：将浓度为5~10×108细胞/l 的培养液用1 L 的塑料瓶1 850 g 离心20 min，将细胞收入50 ml 锥形离心管中（每管收2~3 L 培养液中的细胞）。进行步骤2。②收集单层培养的细胞：单层细胞长满后去掉培养液。用PBS洗1次。将细胞刮入新鲜PBS液里，倒进锥形离心管中。进行步骤2。
2、1 850 g 离心10 min。
3①转瓶培养细胞：测量压紧后细胞的体积。将细胞重悬于约5倍于其pcv的PBS液中，1 850 g 离心10 min。进行步骤4。②单层培养细胞：测量pcv，进行步骤4。
4、快速地将沉淀的细胞重悬于5倍体积的低渗缓冲液中，1 850 g 离心10 min。将细胞沉淀重悬于3倍于原pcv的低渗缓冲液中，放置在冰上10 min，让细胞肿胀。
5、在Dounce氏玻璃匀浆器中用B号研杵缓馒上下抽提10次以上。用台盼蓝染色排斥法在显微镜下检査细胞裂解滑况（应大于80%~90%）。
6、3 300 g 离心15 min，保留上清用来制备S-100细胞质提取物。
7、测量第6步离心沉淀的压紧后的细胞核体积。用1/2 pnv体积的低盐缓冲液重悬细胞核（必要时用Dounce氏玻璃匀浆器匀浆一次）。
8、在轻轻搅拌的同时，逐滴加入1/2 pnv体积的高盐缓冲液。终浓度应约为300 mmol/l。
9、25 000 g 离心30 min，测量核提取物的电导率（用上请，见步骤10）。
10、将核提取物加入透析管中，在50倍体积的透析液中进行透析，直到提取物的电导率和透析液一致为止（当提取物的KCl浓度达到100 mmol/l 时）。尽量缩短透析时间。
11、将提取物从透析袋中移出45 000 g 离心20 min。
12、用Bradford分析法测定上清中蛋白质的浓度。分装，浸入液氮中速冻，- 80℃保存。
    以上就是制备核提取物实验的十二个完整过程，感谢您对上海沪鼎的支持！在广大客户的支持和全体员工的努力下，公司正在日益发展和壮大。全体员工孜孜不倦为国内科研事业单位以及高校等提供的产品服务！