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操作过程中的问题造成假阳性

日期:2013-09-24浏览:1222次

操作过程中的问题造成假阳性
在常见的elisa检测实验中,有很多的过程都会导致实验失败,一点小小的误差也不能尽人意,所有操作过程中一定要注意这些方面,保证实验成功。

3、1加样
对于间接ELISA标本一般都要进行稀释,如果加样不准就会造成误差,尤其当稀释倍数大时,很小的误差,会导致较大的相对误差,使阴性(或弱阳性)标本呈阳性(或阴性)。加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。目前,大部分血站都已使用全自动酶免加样系统处理标本,可较好地避免以上误差。
3、2洗涤
在ELISA中正确的洗涤是保证得到可重复结果的关健一步,应引起操作者重视。无论是手工操作还是机器操作,得出不正确的结果常与不正确的洗涤有关,ELISA就是靠洗涤来达到分离游离和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以消除残留在板孔中没能与固体抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰物质。
3、3 温育
每种试剂都有其*反应模式,其中温度和温育时间控制是重要因素。因孵育温度高,反应时间长,会造成整板本底高,阳性率高。温育一般用湿盒或水浴,反应板不宜叠放,以保证各板温度都能迅速平衡,为避免蒸发,板上应加盖。
3、4酶标仪判读
作为记录测定结果的仪器,酶标仪的性能稳定与否,决定结果的可靠度。首先酶标仪应定期进行保养,对滤光片要定期校正;其次酶标仪波长设置要正确,使用双波长,一个检测波长,一个参比波长,以消除微孔板底部划痕、不平、指印或液面高度差异造成的光干扰。此外,在用酶标仪读数时先擦试微孔板底部并压平板条。由于各种酶标仪性能有所不同。
以上四种方法都有可能在elisa试剂盒检测上令结果不一样,从而导致实验失败,我司技术在经过多次实验中得出以上结论,所以elisa试剂盒实验能否成功取决于多方面的因素,我司所售elisa试剂盒均可保证质量,提供免费技术指导及实验代测服务,为您节省时间,提高实验成功度,咨询关于elisa试剂盒的任何问题。我们恭候您的光临。

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