实验蛋白质分离纯化透析终点的抉择

在蛋白质分离纯化过程中，用到透析方法，但如何判断透析过程结束了呢？针对具体蛋白质怎么知道要透析多久？ 在蛋白质分离纯化实验中，客户经常会提及蛋白质透析终点该如何判断，以下是我司技术根据各种实验总结的经验之谈，方便大家学习交流。

一：
市场上有种笔式电导仪，测量范围在1－2000us/cm，价格才一两百元，使用也非常方便。要是透析后上柱的话，电导在1500以下就可以了。
二：
我做过蛋白的纯化，透析也是常做的。
我觉得上面的一些朋友说得太理论了。楼主刚接触蛋白纯化，用的是透析袋吧。
根据我的经验，想*把蛋白里的盐分透掉不可能，而且蛋白在透析的过程中多少会损失一部分，所以我觉得如果你的蛋白很珍贵，就不用非透得很干净，否则适得其反，经常换超纯水倒是很重要的，一般透个24小时-48小时足够了。要加满水，充分浸泡。
蛋白如果含盐量高，冻干后往往含有结晶样的物质比较多，
而蛋白如果含盐量低，则冻干后往往成棉絮状
这从表观上有助于你判断透析效果，或者你可以取一些蛋白，溶解后测蛋白质质量百分数，剩下的基本就是盐含量了。
提醒你一下：
透析袋不能太小，否则透析后可能会胀破袋子，那就惨了。
太大也不好，容易让蛋白残留在袋内，记得用移液器加蛋白，取蛋白，这样能zui大限度节约蛋白。
三：
如果是NAcl,可用硝酸银溶液滴到透析液中无沉淀浑浊就可以,同样道理如果是硫酸根离子可用氯化钡溶液去滴,别的就不知道了.当然也可用电导仪测定电导,这样.时间长短和你样品盐浓度,透析搅拌速度,用的透析液体积等都有关系,没确切时间.
四：
测电导是非常可行的。
现测你所用透析缓冲液的电导，再测一下你样品的电导，透析到你的样品中的电导率与透析缓冲液的电导率接近为止。

看你更换缓冲液的速度，如果你不断搅拌并1h左右更换一次缓冲液的话4-6次就可以透析的差不多了，如果你不想多次从透析袋中取出样品可以在第六次的时候测一下电导；如果你在4度透析的话建议4h更换一次，加上过一夜一共换3-4次就差不多了。关键看不在什么环境下透析，你的样品在什么样的环境下比较稳定。


蛋白质的定义：
1：生物体中广泛存在的一类生物大分子，由核酸编码的α氨基酸之间通过α氨基和α羧基形成的肽键连接而成的肽链，经翻译后加工而的具有特定立体结构的、有活性的大分子。泛指某一类蛋白质，与前面的限定词组成复合词时，一律用“蛋白质”，如血浆蛋白质、纤维状蛋白质、酶蛋白质等，此时“质”字不得省略（习惯词除外，新命名者从此）。凡指具体蛋白质时，“质”字可省略，如血红蛋白、肌球蛋白等。
2：不同氨基酸以肽键相连所组成的具有一定空间结构的生物大分子物质。
蛋白质（protein）是生命的物质基础，没有蛋白质就没有生命。因此，它是与生命及与各种形式的生命活动紧密在一起的物质。机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。蛋白质占人体重量的16.3%，即一个60kg重的成年人其体内约有蛋白质9.8kg。人体内蛋白质的种类很多，性质、功能各异，但都是由20多种氨基酸按不同比例组合而成的，并在体内不断进行代谢与更新。
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