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人抗鼠抗体的综合操作方法

日期:2013-07-11浏览:2550次

人抗鼠抗体的综合操作方法 
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规格:96T/48T
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性状:盒装液体
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  (一)研究简史
采用单克隆抗体的治疗和基于单克隆抗体的治疗手段已经越来越多地被运用到肿瘤患者、器官移植、自身免疫病(特别是类风湿关节炎)等各方面。研究发现人抗鼠抗体,对于临床诊断和治疗应用及体外特殊的免疫分析都是至关重要的。用人抗鼠抗体在体外进行免疫分析主要用于检测血清中的激素、瘤细胞化生和肿瘤相关性抗原。
    使用鼠单克隆抗体会产生强烈的免疫反应并产生HAMA,因此限制了鼠单克隆抗体在诊断和治疗上的进一步应用,克服这种免疫排斥的方法主要是使用人源化的鼠单克隆抗体和免疫抑制剂。
 
    (二)自身抗原
    1.定义  病人在接受鼠单克隆抗体7-15d后可以产生人抗鼠抗体,接受这种治疗方式的患者体内,可以产生出HAMA的IgM和IgG片段。
    2.特性  HAMA可以与抗原特异性的结合。有两种类型:抗*型抗体、抗同种型抗体。抗*型HAMA即使在人源化的鼠单克隆抗体使用时也可产生,在卵巢肿瘤和类风湿关节炎的患者中,都曾发现抗*型HAMA与具有生物特异性的鼠单克隆抗体产生反应。经研究发现,骨髓抑制治疗,可以有效抑制HAMA以及IV级神经母细胞瘤患者体内抗*型抗体对鼠单克隆抗体的反应。对那些已产生HAMA IgG和IgM片段的所有患者在使用带有17-lA的鼠单克隆抗体,发现43名患者中有41名产生抗*型抗体,20名产生抗*型抗体的抗体。
 
    (三)自身抗体
    1.检测方法 ELISA法可以检测出抗鼠免疫球蛋白抗体,无论是用完整的抗体分子还是用F(ab)2片段包被反应孔。人抗鼠抗体的IgM片段与类风湿因子的滴度有关,而抗鼠抗体的IgG则与RF无关。
    研究还发现检测抗鼠抗体还存在类风湿因子样活性,因为血清中含有类风湿因子的患者体内均可以产生人抗鼠免疫球蛋白抗体,但是这种情况不仅出现于自身免疫病患者,还出现于感染性疾病和肿瘤患者中。
    使用含有F(ab)2片段的ELISA法来进行检测,不仅可以避免预先存在的HA-MA的干扰,还可以有效的监测使用鼠单克隆抗体治疗的患者。尽管这种检测方法的敏感性降低,但由于FC段是重要的免疫调控区,这种方法的特异性大大提高,特别是对于那些有着高活性类风湿因子的患者而言。
    除了ELISA法外,血细胞计数法也是对HAMA进行定量的一种方法,其精度可达到lng/m1,其检测结果与ELISA的结果是一致的。
    放射性免疫分析技术也可以用来检测特异性和非特异性HAMA。对非特异性HA-MA的分析可以区分出预先存在HAMA和单克隆抗体诱导的HAMA~而对特异性HAMA的分析则可以区分出机体在注射不同的单克隆抗体所产生的特异性的免疫反应。
    2.临床意义  反复应用鼠单克隆抗体的主要问题是诱发人抗鼠抗体的产生,为克服这一问题,人们设计出许多不同的方法。如,使用具有免疫抑制潜能的抗体。在动物模型上,使用抗-CD4的单克隆抗体后可以产生持久的免疫耐受,且它比抗-CD3单克隆抗体能更有效地抑制HAMA的产生。运用环孢霉素A也可以抑制:HAMA的产生。在诊断和治疗中使用单克隆抗体还必须考虑到不同抗原的各自复杂的构型,如针对结直肠肿瘤的CEA,就需要使用高亲和力的抗-CEA单克隆抗体,而不是低亲和力抗体。

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