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日期:2024-04-29浏览:478次
一、血清的成分与作用血清的成分与作用
离体的血液凝固之后,经血凝块聚缩释出的液体-----血清。血清可以抗病毒,增强抵抗力血清属于生物制剂,小牛血清含在离开母体后自身产生的一些代谢物质,当然也包括一些生长激素,而胎牛血清绝大部分的物质来自于母体。
血液凝固析出的淡透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血-块收缩,其周围所析出淡透明液体即为血清。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些都是与血浆所区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析都以血清为样品。
血清细胞培养的发展,培养基的质量又是关键,而培养基的主要成分中动物血清对细胞的生长繁殖发挥着难以替代的作用,血清是医药生物技术产品中重要的原材料之一。保证血清质量也是促进生物制品质量提高的重要环节。
二、血清的主要成分
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
对血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题:
1.血清的成分可能有几百种之多,目前对其准确的成分、含量及其作用机制仍不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难;
2.血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制;
3.不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中恶化"的原因之一。
三、血清种类
目前用于组织培养的血清主要是牛血清,培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。
选择用牛血清培养细胞的原因:
1.来源充足、制备技术成熟、经过长时间的应用考验人们对其有比较深入的理解。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都适合,但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。
2.牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成分。牛血清分为小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。胎牛血清品质高,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分少。
3.血清主要作用:
1)提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。
2)提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。
3)提供激素和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质激素(氢化可的松、地塞米松)、类固醇激素(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。
4)对培养中的细胞起到某些保护作用:如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。胰蛋白酶已被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用,血清还含有一些微量元素和离子。
5)提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。