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日期:2021-01-26浏览:1605次
ELISA是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或激素的免疫分析技术。酶联免疫吸附试验的标准程序,通常是把蛋白、抗体、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗体(capture Ab)固定在固相载体上,再加入一级检测抗体(primarydetection Ab),形成一个抗原抗体的复合物。如果该抗体已经用酶(enzyme)标记了,即可用来直接测定抗原的量,若无,则可利用另一个酶标记的二级抗体来测定抗原的量。
1.直接法(direct ELISA)
优势:操作手续简短,因无须使用二抗可避免交互反应。
缺点:试验中的一抗都得用酶标记,但不是每种抗体都适合做标记,费用相对提高。
2.间接法(indirect ELISA)
优势:二抗可以加强信号,而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它多的免疫反应性。
缺点:交互反应发生的机率较高。
3.双抗体夹心法(sandwich ELISA)
优势:高灵敏、高专一性,抗原无须事先纯化。
缺点:抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。
4.竞争法(competitive ELISA)
优势:可适用比较不纯的样本,而且数据再现性很高。
缺点:整体的敏感性和专一性都较差。
5.新ELISA技术:
基于细胞法(cell-based ELISA):
优势:无需裂解细胞,所以目标蛋白损失少,可测定完整细胞、黏附细胞、还有非粘附细胞。
缺点:不能测定抗原量。
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