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ELISA试剂盒是以免疫学反应为基础

日期:2019-11-25浏览:670次

   (一)将抗原的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

    1.食品安全检测ELISA试剂盒的操作原理:
    ELISA的操作步骤:样品收集保存、试剂准备、温育、洗板、显色、比色、包被、加样、加酶标抗体、终止反应、结果判定

    2.影响因素:
    分子量、稳定性、纯化、包被浓度,抗体纯度和产品质量尽管ELISA测定的操作步骤非常简单,但有可能会影响测定结果的因素却较多,分布在测定操作的各步之中,尤以加样、温育和洗板为甚。为帮助大家分析查找测定中出现问题的可能原因,特对常见问题及原因归纳总结于下表。

    (二)临床ELISA试剂盒测定中可能会出现的问题及可能的原因

    1.弱阳性质控样本检测不出 温育的时间或温度不够;显色反应时间太短;所用配制缓冲液的蒸馏水有问题

    2.测定的重复性差 (相同样本两次测定结果不一致) 这是典型的由测定操作引起的问题,包括
    (1)加样本及试剂量不准;孔间不一致;
    (2)加样过快,孔间发生污染;
    (3)加错样本;
    (4)加样本及试剂时,加在孔壁上部非包被区;
    (5)不同批号试剂盒中组分混用;
    (6)温育时间、洗板、显色时间不一致;
    (7)孔内污染杂物;
    (8)酶标仪滤光片不正确;
    (9)血清标本未*凝固即加入,反应孔内出现纤维蛋白凝固或残留血细胞,易出现假阳性反应等。

    3.白板
    (阳性对照不显色) (1)漏加酶结合物;
    (2)洗板液配制中出现问题,如量筒不干净,含酶抑制物(如叠氮钠)等。
    (3)漏加显色剂A或B;
    (4)终止剂当显色剂使用。

    4.全部板孔均有显色 
    (1)洗板不干净;
    (2)显色液变质;
    (3)加底物的吸光受酶污染;
    (4)洗板液受酶等污染。

    (四)关键参数和功能幅度,相应的性价关系
    对于食品检测ELISA试剂盒来说,进口的试剂盒在中国市场上比国产的试剂盒占的份额要大,国产的食品检测ELISA试剂盒主要是在天然毒素上面,国产的食品检测ELISA试剂盒是在检测各种天然毒素上面。就市场上比较早食品检测ELISA进口的主要是:R-biopharm、Neogen国产的试剂盒主要是:近来几年市面上生产此类食品检测ELISA检测试剂盒的公司成长迅速,在中国市面上占份额大的几个公司:长沙安迪、深圳绿诗源、三方圆、安图,科华,索奥等 这几个公司是的食品检测ELISA试剂盒产品比较多,但是有很多以前做动物酶免检测试剂盒的公司也正在进入食品安全检测这个市场。

    (五)是否需要生产商上门指导等复杂的
    一般性食品检测ELISA试剂盒的操作比较简单,不需要生产商去上门指导,而且实验的成功率也大。

    (六)
    产品是否成熟和试剂的稳定性,供应商和能否换货等服务质量食品检测ELISA试剂盒试剂已经成熟,稳定性好,在食品领域中的应用还在扩大;一般在试剂盒出现问题的试剂,只要提供实验报告和以及残留试剂,经厂家鉴定确实属于试剂本身问题的,可以提供退换货服务。

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