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2016-08-31
经甲醛固定的部分组织细胞，因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇，使免疫组化标记敏感性明显降低，因此在染色前，有些抗原需进行修复或暴露。抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法，常用胰蛋白酶及胃蛋白酶，配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和高压加热。在选用这三种方法时，浸泡切片的缓冲液的离子强度和pH、加热的温度和时间均影响着抗原修复效果。1、pH的应用范围及选择抗原修复液的pH非常重要，有效的抗原修复pH要比修复液...2016-08-24
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的zui终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色可以存在各种各样的问题，但从染色的结果看，一般可分为两类：无色片（即无阳性信号）和“杂音”染色片（有阳性信号）。一、无色片染色结束后，切片中见不到任何阳性信号。这是常规工作中比...2016-08-18
ELISA试剂盒实验对照各有所用：一般阳性对照是用来检测试验系统是否正确，若阳性对照为阴性，说明检测系统不正确；阴性对照一般是用无关抗原，阴性对照通常是排除试剂盒检测中是否存在非特异性吸附现象，若阴性对照为阳性，说明抗体能够非特异性结合无关抗原，那么用于检测标本，其特异性就值得怀疑了；空白对照主要是检测各个步骤中试剂是否有问题，也可以检测是否有非特异性吸附现象，具体又可以分包被空白对照、抗原空白对照、一抗空白对照、酶标抗体空白对照……，正规的商品化的试剂盒经过条件优化，只需要...2016-08-15
ELISA试剂盒的实验操作所要求的条件是比较严格的，无论是对实验的硬件条件还是对实验的操作人员的技术要求，都是如此。因此在做ELISA实验时，一定要注意以下几点。1、要保证移液枪的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有专业人员进行矫正。2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后，要更换枪头。即使是吸取标准品时。3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使结果更稳定。4、实验时，要使底物避光保...2016-08-10
elisa试剂盒实验中的封闭液小知识ELISA的试剂盒说明上写封闭液用蔗糖溶液，一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封闭空白位点，蔗糖封闭的原理：1、ELISA实验中，蔗糖本身没有封闭作用;2、封闭液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。3、加蔗糖的主要目的是保护ELISA板子吸附(包被)的蛋白，起到“保护剂”的作用。4、蔗糖溶液一般在ELISA板子经过BSA封闭后加，当然也有将蔗糖加到封闭液中同时进行处理;那一种更好需要你实验后来验证。但多数选择前者。封闭剂还可用5%的脱脂...2016-08-04
如果PaulSimon给RichardLenski长期进化实验（LTEE）中的细菌写首歌，那歌名可以是“这么多年以后仍然在改变。”发表在8月1日《自然》（Nature）杂志上的研究论文中，这位密歇根州立大学的微生物学和分子遗传学教授与一个研究小组，利用先进的技术研究了数万代的大肠杆菌。他们测序了大肠杆菌的全基因组，准确描绘出了一些携带有益突变，使得细菌比它们的祖先具有竞争优势的基因。来自不同代LTEE的这些大肠杆菌已在冷冻箱中保存了近30年，研究人员现在复苏它们查看了它们DN...2016-07-28
zui近，有研究证明了β细胞“中心（hubs）”在胰腺中的显著作用，从而表明糖尿病可能是由于少数特殊细胞的故障导致的，而不是所有β细胞的行为。研究人员利用光遗传学和光药理学（photopharmacological）打靶，来地确定胰岛素分泌所需的细胞起了什么作用。相关研究结果发表在《CellMetabolism》杂志，可能为靶定这些β细胞“中心”的治疗铺平了道路。来自伯明翰大学的DavidHodson博士解释说：“长期以来我们一直怀疑，当谈到胰岛素分泌的时候，并不是所有的细胞...