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2016-10-13
ELISA标准曲线是结果计算的尺子，标准品是ELISA实验成功与否的关键点。怎样正确溶解、稀释标准品呢？1.粉末标准品短暂离心，让因运输沾到管盖、管壁的标准品沉到管底。2.根据瓶标签加入一定体积的蒸馏水，加水后轻柔涡旋震荡，室温静置溶解10-30min，让粉末*溶解。注意：加水后暂不用移液枪吹吸，避免蛋白未溶解，枪头带出部分蛋白，待*溶解后可吹吸或涡旋振荡混匀。3.标准品梯度稀释（1）标准品稀释液的选择：若血清、血浆、组织匀浆样本，用试剂盒中的标准品稀释液，梯度稀释标准品。若...2016-10-08
今天上午，我公司技术人员与钱讨论近日的问题解决情况，而针对近日咨询较多的elisa性能标准问题，我公司的技术专员表示出对elisa试剂盒的参考标准熟知以下7项就够了：一、标准曲线1.定量方法：标准曲线至少由5个浓度组成，测定次数不少于5次，以确定工作浓度范围和IC50范围。2.定性方法：工作浓度范围通过阴性、临界值浓度和阳性的样品测定来确定，每个浓度重复不少于5次，浓度与响应值之间应有一定的关系。二、检测限和定量限1.检测限：20份空白样品测定均值加3倍标准差。2.定量限：应...2016-09-22
Western实验中，经过SDS-PAGE电泳分离后的蛋白质样品需经过“转膜”步骤，从PAGE胶转移到膜上固定，才能用各种方法进行WesternBlot的检测和显示，而且为了防止没有电场的情况下已经分离的蛋白条带扩散，转膜要尽快进行。转膜是对Westernzui终结果影响zui大的一步，转膜质量的好坏直接决定了实验结果的好坏。下面介绍一些实用技巧，赶紧Get起来吧。1.膜的选择膜的选择主要从实验目的和实验要求来考虑，例如做分子量小于20kDa的小蛋白，0.45um的膜是不可取...2016-09-18
近日，英国伦敦大学的研究人员发表在Cell子刊Current-Biology上的一项研究调查了成年大脑通讯中断的驱动机制，尤其是主要负责学习和记忆的海马体内神经细胞间连接的缺失，并发现了隐藏在大脑神经连接缺失背后的关键机制，这些缺失能导致小鼠失忆。一种蛋白质被激活能让小鼠失忆。图片来源：伦敦大学学院神经细胞间连接的破坏是阿尔茨海默氏症等疾病的早期特征，并能引发记忆和思维衰退等令人痛苦的症状，但其背后的生物学机制目前尚不明确。近日，发表在Cell子刊《当代生物学》（Curren...2016-09-13
外泌体是一种直径为30-100nm的纳米级脂质包裹体结构，内部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物质，包括肿瘤细胞在内的几乎所有类型的细胞，都可以产生并释放外泌体。外泌体由细胞分泌释放出来，在血液等体液内传播，zui后又可被其他细胞吞噬，是细胞间通讯的重要介质。外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡，参与细胞间通讯，对外泌体的研究兴趣日益增长，从外泌体研究方向而言，干细胞、免疫、microRNA、靶向给药等都是热门研究领域，2013年诺贝尔生物/医学奖授予三位在细胞囊泡方面贡...2016-09-08
ELISA实验常见问题分析异常结果描述原因分析对策白板显色步骤结束后，酶标板所有孔均无颜色。阳性对照不显色。试剂已过效期，或不同试剂盒组分混用检查试剂的组分及批号，确认未过期以及所有组分均属对应的试剂盒。不同试剂盒或不同批号的试剂不能混用。错加、漏加试剂底物、显色剂A或B严格按说明书的步骤操作，加完试剂后可观察一下液面高度是否一致，以减少漏加现象。洗板及加样过程中，酶标受污染失活失去催化显色剂显色的能力确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等，确认配制洗液的容器已洗干净。终止液...2016-09-05
二抗在IF、IHC、WB、ELISA、FC、EMSA、IP和CHIP等多种研究应用中起到重要作用。正确选择二抗可以增加信号检测，减少背景和非特异染色，优化您的实验结果。如何选择二抗？1.根据一抗的种属来源：GoatantiMouseIgG(H+L),HRP2.根据一抗的类别亚型：GoatantiMouseIgG(H+L),FITCGoatAntiRabbitIgG(γ),PEGoatAntiMouseIgM,FITC3.根据实验检测方法：荧光、化学发光、显色？Goatanti...