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2013-04-01
简述成人胰腺消化、胰岛分离方法：尸体胰腺原位灌洗后置UW液中，4℃保存运输。到实验室后在4℃Euro-Collins液中清除非胰组织，从胰管内插入穿刺针，丝线缝扎后用注射器灌注Liberase酶溶液（1.5mg/ml）。胰腺充分膨胀后将胰腺切片，置消化罐中并放入数颗玻璃珠，加500μm孔径的不锈钢丝网，旋紧罐盖。开启蠕动泵将剩余的Liberase酶溶液泵入罐内，控制罐内温度37℃，手动振摇消化罐循环消化，于10分钟后开始取样镜检，待大部分胰岛分离后用冷的含10%胎牛血清（FB...2013-03-29
如何选择阳性对照？阳性对照即是100%出现该结果的“实验”组，材料是确定的；阴性对照则是肯定不会出现结果的“实验组”，材料也是确定的；之所以加引号，是因为除了实验需要验证的变量，其他条件全部都是一样的，用来排除其他实验情况对结果产生的影响。例如，验证一转基因玉米是否有抗药性，需要选择同种的转基因成功的抗药玉米做阳性对照，无转基因的做阴性对照，从而保证除了该基因其他条件一致；一个成功的实验，通常情况下必须有阳性对照和阴性对照排除其他干扰情况如果您需要合适的阳性对照，请核查数据表...2013-03-27
干扰素（IFN）是一种广谱抗病毒剂，并不直接杀伤或抑制病毒，而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白，从而抑制乙肝病毒的复制；同时还可增强自然杀伤细胞（NK细胞）、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力，从而起到免疫调节作用，并增强抗病毒能力。干扰素是一组具有多种功能的活性蛋白质（主要是糖蛋白），是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子。它们在同种细胞上具有广谱的抗病毒、影响细胞生长，以及分化、调节免疫功能等多种生物活性。实验步骤1.制备诱生剂：采用NDVF系弱毒株，以鸡胚尿囊液...2013-03-25
ELISA双抗体夹心法及间接法的正确操作步骤elisa试剂盒原理ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法（图a）、用于检测抗原的双抗体夹心法（图b）以及用于检测小分子抗原或...2013-03-21
软琼脂（softagar）实验一般用来检测细胞的集落形成能力。现在这种方法越来越多的用于分离癌细胞，也可以用来确认癌细胞是否具有癌化特性，为进一步做肿瘤小鼠移植模型奠定理论基础。该方法看似简单，但如果细节掌握不好，往往导致实验失败或数据缺乏说服力。如果你曾经在这个实验上栽了跟头，请不妨在如下几个方面进行尝试：1.要确保在整个实验过程中所使用的琼脂处于*液体状态（80℃），尤其是在做基底时，如果琼脂凝固过快会导致基底不均一；2.做琼脂基底是应避免产生小气泡，一旦有小气泡产生，应...2013-03-19
血清的常见问题解答一、保存血清的方法？血清应保存在-5℃至-2O℃。然而，若存放于4℃时，请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶，建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。二、如何解冻血清才不会使产品质量受损？将血清从冷冻箱取出后，先置于2-8℃冰箱使之溶解，然后在室温下使之全溶。但必须注意的是，溶解过程中必须规则地摇晃均匀。三、如何避免沉淀物的产生?1、解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法（-2O℃至4℃至室温），若血清解冻时改变的温度太大（如-20℃至37℃），实验...